Quando se deseja amplificar RNA por PCR, a molécula deve inicialmente ser convertida em cDNA complementar, pela enzima transcriptase reversa. 

A PCR convencional permite a obtenção de dados quantitativos sobre as sequências pesquisadas. 

Uma das limitações técnicas do PCR para diagnostico é a facilidade de contaminação do equipamento podendo levar a resultados falso-positivo. 

O resultado da técnica de PCR em tempo real é dado em escala exponencial.