A clonagem de genes em eucariotos envolve a transferência de um gene específico para um...

Q906048 | Biologia, Moléculas, Biotecnologia, IFSP, IF SP, 2024

A clonagem de genes em eucariotos envolve a transferência de um gene específico para um vetor de clonagem, a introdução desse vetor em uma célula hospedeira e a seleção das células que incorporam o gene-alvo. Esse processo é fundamental para a pesquisa científica, para a produção de proteínas recombinantes e para outras aplicações biotecnológicas. Um dos desafios no isolamento de genes eucariotos para clonagem é o fato de estes serem geralmente interrompidos por sequências intervenientes. Dentre as técnicas disponíveis, a RT-PCR (transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase) é a mais utilizada nessa situação. Sobre essa técnica, assinale o que for correto:

a) O transcrito primário contém as sequências intervenientes, ou não codificantes (éxons). O mRNA maduro irá conter apenas as sequências que de fato codificam aminoácidos (íntrons).
b) A enzima transcriptase reversa, utilizada na técnica de RT-PCR, sintetiza cDNA a partir de moléculas de mRNA presentes na amostra. Este cDNA será, então, utilizado como molde pela DNA polimerase.
c) Vetores contendo as sequências originais dos genes eucarióticos podem ser utilizados para a clonagem em bactérias, pois estas possuem os elementos celulares necessários para realizar o processamento (splicing) dos transcritos primários provenientes desses genes.
d) Na RT-PCR, a DNA polimerase converte mRNA em cDNA, na presença de transcriptase reversa, gerando inúmeras cópias da sequência codificante do gene de interesse.