Ao se clonar um determinado gene num vetor de expressão, é comum digerir o sítio de clonagem desse vetor com duas enzimas de restrição diferentes, ao invés de somente uma. O inserto que será clonado também possui, nas suas extremidades, as seqüências dos sítios para as mesmas enzimas de restrição. Esse procedimento é realizado com o objetivo de: A) aumentar o número de cópias do plasmídeo após a transfecção; B) garantir que a cadeia a ser transcrita encontra-se no sentido correto; C) facilitar a purificação da proteína recombinante após a expressão; D) impedir a degradação do produto recombinante por nucleases sítio-específicas; E) favorecer a localização do inserto próximo à região promotora do vetor.

B) garantir que a cadeia a ser transcrita encontra-se no sentido correto;

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1Q380806 | Biologia, Biólogo, IPJB, NCE

Ao se clonar um determinado gene num vetor de expressão, é comum digerir o sítio de clonagem desse vetor com duas enzimas de restrição diferentes, ao invés de somente uma. O inserto que será clonado também possui, nas suas extremidades, as seqüências dos sítios para as mesmas enzimas de restrição. Esse procedimento é realizado com o objetivo de:

✂️ a) aumentar o número de cópias do plasmídeo após a transfecção;
✂️ b) garantir que a cadeia a ser transcrita encontra-se no sentido correto;
✂️ c) facilitar a purificação da proteína recombinante após a expressão;
✂️ d) impedir a degradação do produto recombinante por nucleases sítio-específicas;
✂️ e) favorecer a localização do inserto próximo à região promotora do vetor.