A clonagem de genes em eucariotos envolve
a transferência de um gene específico para um vetor
de clonagem, a introdução desse vetor em uma célula hospedeira e a seleção das células que incorporam o gene-alvo. Esse processo é fundamental para
a pesquisa científica, para a produção de proteínas
recombinantes e para outras aplicações biotecnológicas. Um dos desafios no isolamento de genes
eucariotos para clonagem é o fato de estes serem
geralmente interrompidos por sequências intervenientes. Dentre as técnicas disponíveis, a RT-PCR
(transcrição reversa seguida de reação em cadeia
da polimerase) é a mais utilizada nessa situação.
Sobre essa técnica, assinale o que for correto:
✂️ a) O transcrito primário contém as sequências
intervenientes, ou não codificantes (éxons).
O mRNA maduro irá conter apenas as sequências que de fato codificam aminoácidos
(íntrons). ✂️ b) A enzima transcriptase reversa, utilizada na
técnica de RT-PCR, sintetiza cDNA a partir
de moléculas de mRNA presentes na amostra. Este cDNA será, então, utilizado como
molde pela DNA polimerase. ✂️ c) Vetores contendo as sequências originais dos
genes eucarióticos podem ser utilizados para
a clonagem em bactérias, pois estas possuem
os elementos celulares necessários para realizar o processamento (splicing ) dos transcritos primários provenientes desses genes. ✂️ d) Na RT-PCR, a DNA polimerase converte
mRNA em cDNA, na presença de transcriptase reversa, gerando inúmeras cópias da sequência codificante do gene de interesse.