A coloração de Gram é uma coloração composta que utiliza mais de um corante, além de um...

b) Álcool–Acetona. ✅ Na coloração de Gram, o agente descolorante é a mistura álcool ou álcool-acetona, que remove o corante das bactérias Gram-negativas, mas não das Gram-positivas.

✅ Resposta correta: B – Álcool-Acetona.

Na coloração de Gram, o objetivo do descolorante é diferenciar bactérias Gram-positivas das Gram-negativas com base na estrutura da parede celular:
Gram-positivas → têm uma parede celular espessa de peptidoglicano, que retém o complexo cristal violeta-lugol mesmo após descoloração.
Gram-negativas → têm parede fina de peptidoglicano e uma membrana externa lipídica, que permite que o complexo seja removido pelo descolorante.

Agora, sobre álcool vs. álcool-acetona:
1. Álcool puro:
→ Desidrata a parede celular das Gram-positivas e remove o corante das Gram-negativas.
→ Porém, às vezes não é forte o suficiente para remover completamente o cristal violeta de algumas Gram-negativas, causando falsos Gram-positivos.

2. Álcool-acetona (mistura usada como descolorante):
→ Álcool: desidrata e fixa parcialmente o corante nas Gram-positivas.
→ Acetona: é mais lipofílica, penetra a membrana externa das Gram-negativas e remove o corante de forma mais eficaz.
Essa combinação garante que:
→ Gram-positivas fiquem roxas (retêm o corante)
→ Gram-negativas fiquem coradas pelo contraste (rosadas pelo safranina)

💡 Resumo prático:
O álcool sozinho pode ser ineficiente, enquanto a mistura álcool-acetona aumenta a precisão da coloração, evitando falsos resultados.

Sobre as demais alternativas:
A – Álcool-Ácido clorídrico → usado em coloração ácido-resistente (Bacillus, Mycobacterium), não na Gram ❌
C – Lugol → É o fixador, não descolorante ❌
D – Água deionizada → Serve para lavar a lâmina ❌
E – Peróxido de hidrogênio → Não é usado na Gram ❌